blog

tp://www.news-medical.net/life-sciences/Single-Particle-Tracking-in-Biology.aspx” Din Revizuit de la

Urmărirea cu particule unice (SPT) this o tehnică în dezvoltare rapidă în cell biology. Această tehnică a fost utilizată în the dynamic definition to diffuse the nanoparticulalor și biomoleculelor, using the main sau fluorescentă probă și a fluorescent microscop.

Imaginați-vă creditul: KPWangkanont / Shutterstock

Principiu

În SPT, conform interesului molecular de interes, cu un organet, virusul are un receptor de îngrijire care caracterizează molecula individuală.

Molecule by stocastic interaction with the molecule in its structure cell, it adjusts the diferențierea diferitelor process stocastice ale uni molecule.

Metoda de urmăreur SPT

Detect the particulelor poate fi efuată prin metoda de urmărire manuală și automată. Metoda manuală needs multă muncă thisi this uneori is difficult în cazul în care sunt need seturi de date mari.

În această situație SPie, programează-l software-ul SPT dacă folosești pentru a genera algoritm automat pentru detectarea și legarea uni particle. Defered probes fluorescent care sunt use SPT sunt described mai jos.

Cuantizează points

Punctele quantize sunt consider efficient fluorescent probes, dear sunt mai photostabile decât old coloranți și probes organiza. Acest lucru le face o alegere ideală pentru experiență SPT pe termen lung și aplicații cu celule vii.

Proteine ​​fluorescente

Deși fluorescent proteinele sunt extrem de specifice prin ingineria genetică, he sunt mai mari și mai puțin photostable în compares între fluoroforii organic și molecule mici.

Organic fluorophores cu molecule mici

Organic fluorophores cu molecule mici sunt prepai prin etichetarea chimică a proteinelor sau main încorporarea lor fizică în molecular țintă.

Organic fluorophores cu molecule mici

Povești Connect

Nanoparticle from aur au o dimensiuni mici a particulelor variind de la doi la 100 nm și nu prezintă cytotoxicitate. Acestea prezintă proprietăți puternice de împrăștiere a luminilor și a lungimii de rezonanță a plasmonului.

Probe cu fluorescență ridicată

În afară de acestea, fine fluorescent probe with fost dezvoltate folosind nanoparticle. An example of astfel from the probe this carbon nanotuburile cu pereți unica (SWNT).

SWNT-urile sunt may stable (chimic și fotofizic) decât organic fluorophores. Except altfel probează acest nanodiamond fluorescent (FND), îi lipsește acest sfat de utilizare pentru imagini in vivo.

Avantajul FND this case netxice și photostabile, iar suprafețele lor pot fi modificate for the adăuga diferite grupuri funcționale pentru a-exti extinde aplicații pe or the spectrală long.

Procedura de îndemn în SPT

Principalele avantaje pentru punctatorul cuantizator, pentru nanoparticulatul aurului și pentru FND-urile sunt că sunt recente la albirea fotocalică.

Urgency procedure implica detecting the particular unice and reconstruction traiectoriei particular la fiecare cadru pentru cuantificarea mișcării molecular. Parametrii importanți sunt timpul coeficientului of difuzia, timpul of închidere și timpul of locuit.

Limitări ale SPT

Another problem observation is in timpul reconstrucției traiectoriei particulelor sunt aspectul uni traiectorii unice ca traiectorii fragmentate detectează detectează altor probe pe cell netransfectate.

Cu toate acestea, aceste probleme pot fi limit principal to use the probe cu densitate scăzută a particular și algorithm manuals parțiali pentru reconnect.

Aplicație SPT ale

Analiza activității celulare

SPT to fost used for a înțelege diverse activități din celulele vii, cum ar fi acțiunea therapical an anti-cancer drug, administing a drug, urmărirea unui singur virus, studiul mRNA, studiul endocytozei și exocytozei și studiul therapeutic transport of anticancer drug.

De exemplu, SPT to fost used which successes în îngeelegerea căilor și transport mechanism to the adrenergic receptor în real timp în cella vii unice.recardio farmacia tei

Virologii

Similar, to fost folosite cu succes pentru a studia diferiți viruși, cum ar fi HIV și dengue. Folosind fluorescent microscopic in real time și lipofile fluorescent probe, s-a demonstrat of Dengue virus to pathruns in cell printrafic endocitic mediat de clathrin.

Surse:

Lecturi înainte de suplimente

Ultima actualizare: 3 octombrie 2018

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Good-Manufacturing-Practice-(GMP).aspx” Din Revizuit de la

Liniile directare privind bunele practici de fabrica sie (GMP) is based on a set of reglementări care Guarantees that the products will feed, medical, medical provision și produsele cosmetice sunt produse la o calitate ridicată.

Imaginați-vă Credit: Gorodenkoff / Shutterstock

Orientările GMP încurajează companiile producătoare să garanteze că produsele lor sunt produse în mod constant în medii sigure, în conformitate cu protocoale strict, reducând astfel posibilități și erori de fabricație.

Fabricarea și o practică de origine Bunelor (GMP)

Organizația Mondială a Sănătății (WHO) has stable in details GMP orientations din care multe țări și-au format propriile GMP.

Unele dintre principiale agenții de reglementări a GMP sunt SUA (Codul de reglementări fedele), Europe, Canada, Brazilia, Australia, Regatul Unit, Germany și Africa de Sud. Dintre toate BPF, cele mai frecvente menționate sunt cGMP din SUA (current GMP), ghidul Uniunii Europene pentru GMP pentru produse medicale, Conferința internațională de armonizare (ICH) Q7 Ghidul GMP for GMP active pharmaceutice ingredient (API) ș 2003.

În SUA, access regimentări sunt puse în aplicare de către Administra penta SUA pentru Feed Medically (FDA), yet cum this scribe în secțiunea 501 (B) din Actul privind alimentele, medicamentele utilizează produsele cosmetice din 1938.

Nerespectarea reglementărilor GMP can duce the grave consecințe, cum ar fi retragerea produselor, amenzi puternice sau chiar închise.

GMP în cadrul producției de droguri

Povești Connect

GMP this deosebit of important în domeniul dezvoltării medicamentelor, deoarece sizzle și erorile mici pot duce the serious medical consecinț.

GMP adjusts the reduction of the most frequent multor erori, according to the drug contamination (care pot fi dăunătoare sau chiar letale), etichetare incorectă și form de dozare inconsistent (care ar putea duce supradozaj sau treatment inefficiently).

Procesul de production a accesorilor părți va fi controlat, iar produsul final va fi atribuit, acest semn va folosi eficient funcția.

Principalele GMP reglementări droguri production

Aceste linii directe sunt sfârșitul cuprinzătoare, collect pornography material, instruct în sănătate și siguranță personală uii echipamentele folosite. Main reguli sunt enumerated mai jos:

  • Personalizarea acestei eficiențe nu trebuie să fie efectuată efectiv înregistrarea în procesul de fabricație.
  • Install trebuie curățat și trebuie menținute standarde înalte de igienă și calitate, de la achiziția produsului.
  • Contaminanții trebuie împiedicate să controleze mediile de temperatură și trebuie să fie restricționate de restricții personale.
  • Process it from the factory trebuie wrote într-un mod clar și lucid. Acest document este numărul documentului „procedura de operare standard (SOP)”. Fiecare etapă trebuie validată și optimizată.
  • Fiecare etapă de fabricație trebuie înregistrată.
  • Calitatea și cantitatea produsului medicamentelor trebuie înregistrate.
  • Distribue fiecărui lot trebuie documentată pentru to allow trasabilitatea.
  • Oryx abbere de la SOP trebuie investigată și înregistrată.
  • I distribute trebuie să fie făcut cu atenție pentru a preveni deteriorarea și a menține calitatea medicamentului.
  • Complaint trebuie să investigheze și trebuie să pună în aplicare un plan de urgență eficient pentru gestionarea situației precise the fog of back to medicalolor sau actualizare etichetei medicalor etc.

Aceste linie directă this GMP donate flexibilă și dorită, allow to implement the production of către producător.

Viitorul GMP

Orientările GMP sunt orientări strict care sunt în vigoare pentru proteja interesului clientului, assigning efficient free zone of products of înaltă calitate și efficient. În prezent, FDA subliniază calitatea prin design, mai degrabă decât prin testare.

Industria farmaceutică se concentrează pe producția și producția eficientă pe baza Statelor Unite folosind principiul aplicabilităților domeniului limbii engleze.

Aplicat în principal într-o manieră treptată fără a calcula un produs, ajustând planul de management pentru a reduce producătorul pentru măsură.

Surse

Lecturi înainte de suplimente

Ultima actualizare: 26 februarie 2019

Revizuirea „Https://www.news-medical.net/life-sciences/Yeast-two-hybrid-(Y2H).aspx”

Sistemul cu două hibrizi de drojdie (Y2H) this or tehnică genetică used for a determină interacțiuniile proteină-proteină. Approaches are rapid, profitable folosește ușor.

Credit: Kateryna Kon / Shutterstock

Cartarea interacțiunii oferă explicații clare fără a organiza proteomei (organismele, țesuturile și celulele exprimate complete complete protein) în unități funcționale. Check date sunt esențiale pentru elucidarea mecanismelor biologice.

Instrumentele Y2H servesc drept access the întregul cellular proteom pentru screeningul interacțiunilor proteină-proteină, including membrane proteinele, proteinele localized in different compartmental subcellular și proteinele care sunt active transcriptional.

Y2H poate fi automatizat pentru cercetări cu randament ridicat de interacțiune proteină-proteină pe scară largă a genomului.

Principiul sistemului Y2H

Interacțiunea între proteinele și proteinele this localization între proteinele proteice momentane și reglează active zone a reportului general de îngrijire, permițând creterea, its reaction is ipotezelor, pentru a specific drug.

Term “doi hibrizi” this inventary din cele două kind of protein hibride sau himerice. Protein of interest “x” is a legacy domain to DNA-ului (DBD-x) fuzionează for the form “momeală”. Fuziunea domeniului de activare transcripțională (AD-y) ai a uni liboteci cDNA „y“ are ca result “pradă”. Aceste două clase formează truc system of detecting a protein-protein interaction.

Fără interacțiunea momeală-pradă, domeniul de activare nu poate limita unitatea de squeeze la genei genei.

Variații ale lui Y2H

Variațiile sistemului Y2H în funcții de interacțiune proteinelor. Sistemul disponibilității reale sunt:

Reprimați sistemul transactivator

Sistemul Y2H transactivator reprimat (RTA) a fost creat pentru a identifies genetic interac impions care implică transcripaleional protein activators.

Editi folosirea acestui sistem pentru a permite folosirea acestuia pentru a monitoriza interacțiunea inhibitoare dintre proteine ​​și proteină și implică calculatoare cu colecție mică.

Interacțiunea inhibitoare cu îngrijirea implicată proteină poate fi evaluată prin screening-ul creșterii și îngrijire selectivă medium cu 3-aminotriazole (3-AT).

Povești Connect

Această metodă a fost, de asemenea, utilizată pentru a identifica inhibițiile a patru interacțiuni independente proteină-proteină în ecrane care cu îngrijire sau bibliotecă compusă din 23,000 molecule mici. Compușii care to the one dintre FKBP12 – TGFbeta-R (factorul de cre detere transforming beta) to fost, de asemenea, inhibații.

Sistem de transcriere a polimerazei III

Sistemul de transcriere Polimeraza III (Pol III) permite interacțiunea factorului de transcripție cu îngrijirea transcripției active proteinele dacă se bazează pe RNA-ul polimerazei II. Protein X is fuzionată cu momeală (Gal4-DBD) in a traditional Y2H lego securăturier system in SNR6 (gena reporter) are ca rezultat capacitatea momelii de a ata DNA DNA.

Cu toate acestea, construcția prăzii this modie but masură ce a doua proteină And it fuzionează cu τ138p. TFIIC complex conține această proteină ca subunitate.

τ138p există factorul de transcripție factorul de transcripție median (RNA polimeraza III) Pol III. Interac careiunea care appears între momeală și pradă (conținând τ138p) are caresult legarea complexului TFIIIC of DNA recri recruitarea TFIIIB (an al doilea transcription factor) și Pol III.

Acest lucru are ca rezultat activarea transcripției genei raportoare SNR6 for the U6 snRNA turn.

Screening pentru interacțiunile dintre sistemul extracellular proteinelor

Screeningul pentru interacțiunea dintre extracellular protein system (SCINEX-P system) permite analiza interacțiunilor dintre proteine ​​și reticulul endoplasmatic.

În acest sistem, fuziunea are loc între proteinele Ire1p mutate proteini proteinele of interest, unde proteinele Ire1p mutate nu în domeniul lor luminal.

Interacțiunea care appears between cele două proteic hybrid are ca rezultat reconstituirea dimerizării Ire1p și activarea semnalizării în endorsement a răspunsului proteic defășurat (UPR). Element of răspuns proteic Hac1p defășurat care a fost introdus în promoter genei reporter adjută la screening-ul interacțiunilor proteină-proteină.

Acest sistem Y2H has fost implicat cu succes pentru analiza interacțiunilor dintre Calnexin și protein disulfură izomerază ERp57 și interacțiunile dintre anticorpi și antigeni.

Sistem de recrutare SOS și RAS (SRS și RRS)

Sistemul de recrare SOS implică proteina X solubilă în mamiferul SOS. Interac diunea dintre fuziunea SOS-X ori or pradă localizată într-o membrană are ca rezultat promote semnalizării în endorsement și stimularea schimbării de guanil pe yRAS.

System of recruiting RAS implica fuziunea RAS active mamiferelor și a soluble protein X. System needs to do the localization of the membrane implicit activitate factoror de schimb Ras guanyl.

Atât RRS cát și SRS ajută analysis interacționară care apart între membrană sau pradă solubilă și momeli solubil. Sistem invers de recruitare RAS pentru a dezvolta utilizarea specială a îngrijirii momelor sunt localizate de membrană.

Sistemul fuziunii proteinelor G.

Acest sistem permite interacțiunea dintre proprietăți de moment și cele mai solubilizate, to give naked implicuz fuziune protein cu subunitate gamma the protein G heterotrimerică.

Interacțiunea prăzii cu momeala care găsesc pe membrană sunt ca rezultat Sechestrarea subunităților β ale proteini G duces the întreruperea formării complexului heterotrimeric de proteină G și senalizarea succesivă în endorsement.

I will address this most most used tool to identification a neuronal mutanților Sec1 care sunt incapabili de legarea syntaxinei1 (a SNARE complex membrane).

În plus façade of RTA Y2H, Protein G Y2H identifică îngrijirea medicală pentru interacțiunile protejate-disturbed protein.

Surse:

  1.  

Lecturi înainte de suplimente

Ultima actualizare: 26 februarie 2019

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/Biological-Obstacles-of-Gold-Nanoparticles.aspx” Din Revizuit de

Nanoparticles of aur cuprine diametral cuprinse între 1-100 nm prei prezintă a potențial mare ca vehicul pentru administrarea medicamentului, contrast agent, biosenzori și potențiator la radiații duzini. How to do it, how to choose from the modului în care proprietate sunt fizice chimi chimice ale acestor particulate interacționate cu o biologie.

Intravenous administrarea, nanoparticulele trebuie să depășească opsonizarea și eliminarea prin baza reticuloendothelial, să localizeze tumorile, să pătrundă în celulă.

Nanoparticle of aur de diferite form obținute prin ablația laserului în apă. Imaginați-vă creditul: Georgy Shafeev / Shutterstock

Chimia suprafeței nanoparticulelor

Protein pre-sânge accumulates as corpuri străine, cum ar fi nanoparticle pentru absorbed și exreție de către celulele phagocytosis

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/Single-Particle-Tracking-in-Biology.aspx” Din Revizuit de la

Urmărirea cu particule unice (SPT) this o tehnică în dezvoltare rapidă în cell biology. Această tehnică a fost utilizată în the dynamic definition to diffuse the nanoparticulalor și biomoleculelor, using the main sau fluorescentă probă și a fluorescent microscop.

Imaginați-vă creditul: KPWangkanont / Shutterstock

Principiu

În SPT, conform interesului molecular de interes, cu un organet, virusul are un receptor de îngrijire care caracterizează molecula individuală.

Molecule by stocastic interaction with the molecule in its structure cell, it adjusts the diferențierea diferitelor process stocastice ale uni molecule.

Metoda de urmăreur SPT

Detect the particulelor poate fi efuată prin metoda de urmărire manuală și automată. Metoda manuală needs multă muncă thisi this uneori is difficult în cazul în care sunt need seturi de date mari.

În această situație SPie, programează-l software-ul SPT dacă folosești pentru a genera algoritm automat pentru detectarea și legarea uni particle. Defered probes fluorescent care sunt use SPT sunt described mai jos.

Cuantizează points

Punctele quantize sunt consider efficient fluorescent probes, dear sunt mai photostabile decât old coloranți și probes organiza. Acest lucru le face o alegere ideală pentru experiență SPT pe termen lung și aplicații cu celule vii.

Proteine ​​fluorescente

Deși fluorescent proteinele sunt extrem de specifice prin ingineria genetică, he sunt mai mari și mai puțin photostable în compares între fluoroforii organic și molecule mici.

Organic fluorophores cu molecule mici

Organic fluorophores cu molecule mici sunt prepai prin etichetarea chimică a proteinelor sau main încorporarea lor fizică în molecular țintă.

Organic fluorophores cu molecule mici

Povești Connect

Nanoparticle from aur au o dimensiuni mici a particulelor variind de la doi la 100 nm și nu prezintă cytotoxicitate. Acestea prezintă proprietăți puternice de împrăștiere a luminilor și a lungimii de rezonanță a plasmonului.

Probe cu fluorescență ridicată

În afară de acestea, fine fluorescent probe with fost dezvoltate folosind nanoparticle. An example of astfel from the probe this carbon nanotuburile cu pereți unica (SWNT).

SWNT-urile sunt may stable (chimic și fotofizic) decât organic fluorophores. Except altfel probează acest nanodiamond fluorescent (FND), îi lipsește acest sfat de utilizare pentru imagini in vivo.

Avantajul FND this case netxice și photostabile, iar suprafețele lor pot fi modificate for the adăuga diferite grupuri funcționale pentru a-exti extinde aplicații pe or the spectrală long.

Procedura de îndemn în SPT

Principalele avantaje pentru punctatorul cuantizator, pentru nanoparticulatul aurului și pentru FND-urile sunt că sunt recente la albirea fotocalică.

Urgency procedure implica detecting the particular unice and reconstruction traiectoriei particular la fiecare cadru pentru cuantificarea mișcării molecular. Parametrii importanți sunt timpul coeficientului of difuzia, timpul of închidere și timpul of locuit.

Limitări ale SPT

Another problem observation is in timpul reconstrucției traiectoriei particulelor sunt aspectul uni traiectorii unice ca traiectorii fragmentate detectează detectează altor probe pe cell netransfectate.

Cu toate acestea, aceste probleme pot fi limit principal to use the probe cu densitate scăzută a particular și algorithm manuals parțiali pentru reconnect.

Aplicație SPT ale

Analiza activității celulare

SPT to fost used for a înțelege diverse activități din celulele vii, cum ar fi acțiunea therapical an anti-cancer drug, administing a drug, urmărirea unui singur virus, studiul mRNA, studiul endocytozei și exocytozei și studiul therapeutic transport of anticancer drug.

De exemplu, SPT to fost used which successes în îngeelegerea căilor și transport mechanism to the adrenergic receptor în real timp în cella vii unice.recardio farmacia tei

Virologii

Similar, to fost folosite cu succes pentru a studia diferiți viruși, cum ar fi HIV și dengue. Folosind fluorescent microscopic in real time și lipofile fluorescent probe, s-a demonstrat of Dengue virus to pathruns in cell printrafic endocitic mediat de clathrin.

Surse:

Lecturi înainte de suplimente

Ultima actualizare: 3 octombrie 2018

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Good-Manufacturing-Practice-(GMP).aspx” Din Revizuit de la

Liniile directare privind bunele practici de fabrica sie (GMP) is based on a set of reglementări care Guarantees that the products will feed, medical, medical provision și produsele cosmetice sunt produse la o calitate ridicată.

Imaginați-vă Credit: Gorodenkoff / Shutterstock

Orientările GMP încurajează companiile producătoare să garanteze că produsele lor sunt produse în mod constant în medii sigure, în conformitate cu protocoale strict, reducând astfel posibilități și erori de fabricație.

Fabricarea și o practică de origine Bunelor (GMP)

Organizația Mondială a Sănătății (WHO) has stable in details GMP orientations din care multe țări și-au format propriile GMP.

Unele dintre principiale agenții de reglementări a GMP sunt SUA (Codul de reglementări fedele), Europe, Canada, Brazilia, Australia, Regatul Unit, Germany și Africa de Sud. Dintre toate BPF, cele mai frecvente menționate sunt cGMP din SUA (current GMP), ghidul Uniunii Europene pentru GMP pentru produse medicale, Conferința internațională de armonizare (ICH) Q7 Ghidul GMP for GMP active pharmaceutice ingredient (API) ș 2003.

În SUA, access regimentări sunt puse în aplicare de către Administra penta SUA pentru Feed Medically (FDA), yet cum this scribe în secțiunea 501 (B) din Actul privind alimentele, medicamentele utilizează produsele cosmetice din 1938.

Nerespectarea reglementărilor GMP can duce the grave consecințe, cum ar fi retragerea produselor, amenzi puternice sau chiar închise.

GMP în cadrul producției de droguri

Povești Connect

GMP this deosebit of important în domeniul dezvoltării medicamentelor, deoarece sizzle și erorile mici pot duce the serious medical consecinț.

GMP adjusts the reduction of the most frequent multor erori, according to the drug contamination (care pot fi dăunătoare sau chiar letale), etichetare incorectă și form de dozare inconsistent (care ar putea duce supradozaj sau treatment inefficiently).

Procesul de production a accesorilor părți va fi controlat, iar produsul final va fi atribuit, acest semn va folosi eficient funcția.

Principalele GMP reglementări droguri production

Aceste linii directe sunt sfârșitul cuprinzătoare, collect pornography material, instruct în sănătate și siguranță personală uii echipamentele folosite. Main reguli sunt enumerated mai jos:

  • Personalizarea acestei eficiențe nu trebuie să fie efectuată efectiv înregistrarea în procesul de fabricație.
  • Install trebuie curățat și trebuie menținute standarde înalte de igienă și calitate, de la achiziția produsului.
  • Contaminanții trebuie împiedicate să controleze mediile de temperatură și trebuie să fie restricționate de restricții personale.
  • Process it from the factory trebuie wrote într-un mod clar și lucid. Acest document este numărul documentului „procedura de operare standard (SOP)”. Fiecare etapă trebuie validată și optimizată.
  • Fiecare etapă de fabricație trebuie înregistrată.
  • Calitatea și cantitatea produsului medicamentelor trebuie înregistrate.
  • Distribue fiecărui lot trebuie documentată pentru to allow trasabilitatea.
  • Oryx abbere de la SOP trebuie investigată și înregistrată.
  • I distribute trebuie să fie făcut cu atenție pentru a preveni deteriorarea și a menține calitatea medicamentului.
  • Complaint trebuie să investigheze și trebuie să pună în aplicare un plan de urgență eficient pentru gestionarea situației precise the fog of back to medicalolor sau actualizare etichetei medicalor etc.

Aceste linie directă this GMP donate flexibilă și dorită, allow to implement the production of către producător.

Viitorul GMP

Orientările GMP sunt orientări strict care sunt în vigoare pentru proteja interesului clientului, assigning efficient free zone of products of înaltă calitate și efficient. În prezent, FDA subliniază calitatea prin design, mai degrabă decât prin testare.

Industria farmaceutică se concentrează pe producția și producția eficientă pe baza Statelor Unite folosind principiul aplicabilităților domeniului limbii engleze.

Aplicat în principal într-o manieră treptată fără a calcula un produs, ajustând planul de management pentru a reduce producătorul pentru măsură.

Surse

Lecturi înainte de suplimente

Ultima actualizare: 26 februarie 2019

Revizuirea „Https://www.news-medical.net/life-sciences/Yeast-two-hybrid-(Y2H).aspx”

Sistemul cu două hibrizi de drojdie (Y2H) this or tehnică genetică used for a determină interacțiuniile proteină-proteină. Approaches are rapid, profitable folosește ușor.

Credit: Kateryna Kon / Shutterstock

Cartarea interacțiunii oferă explicații clare fără a organiza proteomei (organismele, țesuturile și celulele exprimate complete complete protein) în unități funcționale. Check date sunt esențiale pentru elucidarea mecanismelor biologice.

Instrumentele Y2H servesc drept access the întregul cellular proteom pentru screeningul interacțiunilor proteină-proteină, including membrane proteinele, proteinele localized in different compartmental subcellular și proteinele care sunt active transcriptional.

Y2H poate fi automatizat pentru cercetări cu randament ridicat de interacțiune proteină-proteină pe scară largă a genomului.

Principiul sistemului Y2H

Interacțiunea între proteinele și proteinele this localization între proteinele proteice momentane și reglează active zone a reportului general de îngrijire, permițând creterea, its reaction is ipotezelor, pentru a specific drug.

Term “doi hibrizi” this inventary din cele două kind of protein hibride sau himerice. Protein of interest “x” is a legacy domain to DNA-ului (DBD-x) fuzionează for the form “momeală”. Fuziunea domeniului de activare transcripțională (AD-y) ai a uni liboteci cDNA „y“ are ca result “pradă”. Aceste două clase formează truc system of detecting a protein-protein interaction.

Fără interacțiunea momeală-pradă, domeniul de activare nu poate limita unitatea de squeeze la genei genei.

Variații ale lui Y2H

Variațiile sistemului Y2H în funcții de interacțiune proteinelor. Sistemul disponibilității reale sunt:

Reprimați sistemul transactivator

Sistemul Y2H transactivator reprimat (RTA) a fost creat pentru a identifies genetic interac impions care implică transcripaleional protein activators.

Editi folosirea acestui sistem pentru a permite folosirea acestuia pentru a monitoriza interacțiunea inhibitoare dintre proteine ​​și proteină și implică calculatoare cu colecție mică.

Interacțiunea inhibitoare cu îngrijirea implicată proteină poate fi evaluată prin screening-ul creșterii și îngrijire selectivă medium cu 3-aminotriazole (3-AT).

Povești Connect

Această metodă a fost, de asemenea, utilizată pentru a identifica inhibițiile a patru interacțiuni independente proteină-proteină în ecrane care cu îngrijire sau bibliotecă compusă din 23,000 molecule mici. Compușii care to the one dintre FKBP12 – TGFbeta-R (factorul de cre detere transforming beta) to fost, de asemenea, inhibații.

Sistem de transcriere a polimerazei III

Sistemul de transcriere Polimeraza III (Pol III) permite interacțiunea factorului de transcripție cu îngrijirea transcripției active proteinele dacă se bazează pe RNA-ul polimerazei II. Protein X is fuzionată cu momeală (Gal4-DBD) in a traditional Y2H lego securăturier system in SNR6 (gena reporter) are ca rezultat capacitatea momelii de a ata DNA DNA.

Cu toate acestea, construcția prăzii this modie but masură ce a doua proteină And it fuzionează cu τ138p. TFIIC complex conține această proteină ca subunitate.

τ138p există factorul de transcripție factorul de transcripție median (RNA polimeraza III) Pol III. Interac careiunea care appears între momeală și pradă (conținând τ138p) are caresult legarea complexului TFIIIC of DNA recri recruitarea TFIIIB (an al doilea transcription factor) și Pol III.

Acest lucru are ca rezultat activarea transcripției genei raportoare SNR6 for the U6 snRNA turn.

Screening pentru interacțiunile dintre sistemul extracellular proteinelor

Screeningul pentru interacțiunea dintre extracellular protein system (SCINEX-P system) permite analiza interacțiunilor dintre proteine ​​și reticulul endoplasmatic.

În acest sistem, fuziunea are loc între proteinele Ire1p mutate proteini proteinele of interest, unde proteinele Ire1p mutate nu în domeniul lor luminal.

Interacțiunea care appears between cele două proteic hybrid are ca rezultat reconstituirea dimerizării Ire1p și activarea semnalizării în endorsement a răspunsului proteic defășurat (UPR). Element of răspuns proteic Hac1p defășurat care a fost introdus în promoter genei reporter adjută la screening-ul interacțiunilor proteină-proteină.

Acest sistem Y2H has fost implicat cu succes pentru analiza interacțiunilor dintre Calnexin și protein disulfură izomerază ERp57 și interacțiunile dintre anticorpi și antigeni.

Sistem de recrutare SOS și RAS (SRS și RRS)

Sistemul de recrare SOS implică proteina X solubilă în mamiferul SOS. Interac diunea dintre fuziunea SOS-X ori or pradă localizată într-o membrană are ca rezultat promote semnalizării în endorsement și stimularea schimbării de guanil pe yRAS.

System of recruiting RAS implica fuziunea RAS active mamiferelor și a soluble protein X. System needs to do the localization of the membrane implicit activitate factoror de schimb Ras guanyl.

Atât RRS cát și SRS ajută analysis interacționară care apart între membrană sau pradă solubilă și momeli solubil. Sistem invers de recruitare RAS pentru a dezvolta utilizarea specială a îngrijirii momelor sunt localizate de membrană.

Sistemul fuziunii proteinelor G.

Acest sistem permite interacțiunea dintre proprietăți de moment și cele mai solubilizate, to give naked implicuz fuziune protein cu subunitate gamma the protein G heterotrimerică.

Interacțiunea prăzii cu momeala care găsesc pe membrană sunt ca rezultat Sechestrarea subunităților β ale proteini G duces the întreruperea formării complexului heterotrimeric de proteină G și senalizarea succesivă în endorsement.

I will address this most most used tool to identification a neuronal mutanților Sec1 care sunt incapabili de legarea syntaxinei1 (a SNARE complex membrane).

În plus façade of RTA Y2H, Protein G Y2H identifică îngrijirea medicală pentru interacțiunile protejate-disturbed protein.

Surse:

  1.  

Lecturi înainte de suplimente

Ultima actualizare: 26 februarie 2019

„Http://www.news-medical.net/life-sciences/Biological-Obstacles-of-Gold-Nanoparticles.aspx” Din Revizuit de

Nanoparticles of aur cuprine diametral cuprinse între 1-100 nm prei prezintă a potențial mare ca vehicul pentru administrarea medicamentului, contrast agent, biosenzori și potențiator la radiații duzini. How to do it, how to choose from the modului în care proprietate sunt fizice chimi chimice ale acestor particulate interacționate cu o biologie.

Intravenous administrarea, nanoparticulele trebuie să depășească opsonizarea și eliminarea prin baza reticuloendothelial, să localizeze tumorile, să pătrundă în celulă.

Nanoparticle of aur de diferite form obținute prin ablația laserului în apă. Imaginați-vă creditul: Georgy Shafeev / Shutterstock

Chimia suprafeței nanoparticulelor

Protein pre-sânge accumulates as corpuri străine, cum ar fi nanoparticle pentru absorbed și exreție de către celulele phagocytosis.

%d blogcu bunu beğendi: